Des gènes suicidaires contre le cancer (et Il Partage II)

Je recommande aux lecteurs qu'ils se soient pas passé par l'entrée précédente qu'ils le font pour se mettre dans une situation. De toute façon, ici je vous laisse un résumé pour se rafraîchit la mémoire : Dans le post précédent nous arrivons à la conclusion de ce que la thérapie génétique est une manière de lutter contre le cancer. De même, nous avons vu qu'une option serait d'introduire le gène de la TK sous l'influence d'un promoteur qui est seulement reconnu pour des cellules tumorales. Après, quand le Ganciclovir a été administré, les cellules tumorales seront capables de fosforilarlo en transformant ce prodroga inoffensif dans toxique et en provoquant la mort de la cellule tumorale. Maintenant nous verrons comment nous pouvons introduire des gènes dans l'organisme et si nous voulons que ces gènes restent avec nous pour toujours.

Il y a des manières multiples d'introduire des gènes dans des cellules quand celles-ci sont en dehors de l'organisme. Nous pouvons mettre simplement l'ADN à la portée des cellules et espérer qu'elles l'internalicen et ils ne le dégradent pas. Nous pouvons aussi l'envelopper avec une monocape de lípidos qui fusionne avec la membrane de la cellule et même nous pouvons bombarder la cellule avec les microballes recouvertes d'or d'ADN (oui, on peut, et elle s'appelle biobalistique). Le problème est quand les cellules font une partie d'un organisme. D'un côté, l'accès aux cellules est plus difficile, et d'un autre côté nous avons des cellules multiples distinctes plus ou moins ordonnées. Toutes les méthodes précédentes sont étudiées pour introduire des gènes un-vif. Mais ce ne sont pas les choses uniques. Il y a l'une tu structures supramoleculares (qui sont en vie ou ce n'est pas un sujet de débat) qui mènent en introduisant ADN dans nos cellules depuis que l'homme est homme. Les virus. Et oui, des virus peuvent s'utiliser à mettre ADN dans des cellules de manière plus ou moins dirigée.

Après parler d'utiliser un virus avec humains les gens tendent à imaginer des films de zombis. Heureusement, le résultat n'est pas si amusant. Les virus sont basiquement l'une enveloppée des protéines autour d'un matériel génétique. Il y a un virus de tous les types que vous pouvez imaginer. Il y a un virus qu'au lieu d'ADN ils utilisent ARN, il y a des virus qui ont le génome circularizado et il y a des virus linéaires, il y a un virus avec enveloppée lipídica et il y a des virus "nus". Mais tous ont une chose en commun. Ils ont besoin d'une cellule qui leur sert d'un hôte et qui est capable de répliquer son matériel génétique pour pouvoir se multiplier.

Grosso une manière, le cycle “d'une vie“ d'un virus est plus ou moins ainsi : d'abord il reconnaît à la cellule qu'il a que parasitar. Par la suite il est fixé à elle et ensuite un réveil pénètre dans la cellule et il se libère de son enveloppée. Maintenant le virus peut forcer à la cellule à réaliser depuis des copies de son matériel génétique directement, ou bien s'intégrer dans l'ADN de la cellule et passer à une phase dans laquelle il restera latent pendant un temps variable. Ensuite, elle vient, la phase dans laquelle un hôte oblige le virus à la cellule à fabriquer les protéines du virus ainsi qu'à son matériel génétique. Enfin, le virus est assemblé et est libéré à l'extérieur. Cette dernière phase peut provoquer la rupture de la cellule parasitada.

Merci laos un virus nous avons une machinerie qui porte des milliers d'années en évoluant pour obtenir que nous nous proposons. Introduire des gènes dans des cellules concrètes. Maintenant il faut seulement éviter quelques problemitas : éviter que le virus se multiplie en dehors d'où nous nous voulons, faire qu'il exprime seulement les gènes qui nous intéressent où il nous est intéressant et diriger le virus où nous nous proposons et pas où le quiere. Facile ? Non.

Pour modifier celles-ci caractéristiques du virus il faut comprendre que rendent chacune de ses parts. Pour que cela ne devient pas une classe de virologie, je me concentrerai sur les modifications qui donneront lieu à réussir à exprimer le gène de la TK dans les cellules que nous voulons. De plus, notre virus aura un especificidad qui viendra déterminé au promoteur qui réglera le gène de la TK, et pas pourquoi il infecte des cellules ou arrête d'infecter. C'est-à-dire le virus peut rentrer “où lui de l'envie” mais il exprimera seulement les gènes où nous voulons.

Ainsi, quand nous parlons de mettre des gènes dans l'organisme il y a deux options. Que ceux-ci restent pour toujours avec nous. C'est-à-dire qui s'intègrent dans notre génome et se mettent à être partie de nous. Ou bien qui sont seulement un temps. Le juste pour qu'ils réalisent la fonction que nous voulons qu'ils occupent. Si qu'il nous sera intéressant dehors de modifier d'une manière permanente notre génome nous utiliserions les premiers, mais comme ce qui nous intéresse est de mettre des gènes dans les cellules que nous cherchons à tuer … Mieux qu'il ne reste pas beaucoup de temps. De cette façon, et comme modèle de virus d'ADN non integrativo, nous prendrons les adenovirus.

Les adenovirus sont virus bicaténaires d'ADN linéaire enveloppés par un cápside protéique icosaédrica non integrativos. Ou ce qui est le même, L'une enveloppée des protéines autour d'un génome d'ADN de double fil et qui s'exprime d'une manière transitoire. En sortant du cápside nous trouvons les fibrilar protéiques qui se chargent de diriger le virus vers ses réveils spécifiques

Les Adenovirus requièrent des certains gènes pour pouvoir être répliqué. Sans ceux-ci, le virus est seulement l'une enveloppée des protéines qu'un matériel génétique "stérile" dirige à la cellule un réveil. Le premier que nous ferons alors est d'éliminer ces gènes (nous n'allons pas produire le virus qu'ils tuent au tumeur directement étant répliqué dans lui, bien que ce soit une autre voie d'investigation réellement intéressante). Le problème consiste en ce que sans les protéines pour lesquelles ils codent ces gènes le virus ne peut pas être généré. Pour acquitter ce problème, dans le laboratoire on utilise quelques cellules productrices de virus qui contient les gènes dont le virus a besoin pour se multiplier. Dans ces cellules, il leur s'introduit, le génome du virus auquel nous lui avons pris la région qu'il lui est permis de répliquer. De cette façon, à l'intérieur de ces cellules le virus aura tout ce dont il a besoin pour être généré, cependant, quand le virus infectera de nouvelles cellules “normales” il ne sera pas capable de se multiplier dans celles-ci.

D'un autre côté, il nous intéresse que notre virus s'introduit dans des tumeurs. D'une manière normale le virus le fera déjà, non beaucoup, mais il le fera. Une autre amélioration utile est de modifier la fibre de l'adenovirus. C'est la région qui donnera especificidad sur le virus. Quelques modifications de celle-ci une région virale provoquent que le virus entre plus dans les tumeurs. Enfin, nous mettrons le gène qu'il code pour la TK précédé par le promoteur qui permettra seulement son expression dans des cellules tumorales. Avec ces modifications avons-nous obtenu un vecteur efficient et que la TK exprime seulement dans des tumeurs ? Malheureusement non. L'"atmosphère" génétique qui s'entoure au gène de la TK est capable d'induire son expression de manière basale. De plus, les adenovirus ont une fixation assez importante bien qu'ils infectent des cellules hépatiques.

Pour acquitter le premier des problèmes, elles se réalisent, les nombreuses investigations que possiblement dans un avenir ils doteront à ces vecteurs viraux d'un especificidad beaucoup plus élevé. En ce qui concerne l'infection hépatique, on a vu que la cape protéique de l'adenovirus (càpside) enveloppe du facteur de coagulation X quand il est dans le torrent sanguin. Le facteur de coagulation X est une protéine qui excelle par notre système circulatoire et fait que les cellules hépatiques internalicen le virus. Pour résoudre cela, on enquête sur soi dans utiliser d'autre type de virus pas humains et qui ne peuvent pas reconnaître ce facteur de coagulation. Les résultats sont très positifs dans cet aspect. Ou presque. Un autre problème additif consiste en ce que les photomacrographies hépatiques (d'autre type de cellules qui se trouvent dans le foie) ont quelques récepteurs qui reconnaissent les adenovirus et les fagocitan (internalizan). Ce ne serait pas un problème s'il n'était pas par l'expression basale à laquelle ils ont les gènes gráce à l'atmosphère virale. Cette expression basale provoque une toxicité et des effets secondaires.

Enfin, mais pas moins important, nous avons la réponse du système exempt. Le système immunologique mène en évoluant pour lutter contre les virus depuis l'existence des mêmes. De cette façon, bien que nous utilisions un virus que l'organisme n'est pas capable de reconnaître “à la première”, c'est capable d'apprendre et il déchaînera une forte réponse immunologique en face de la deuxième dose. Et quand je dis fort, je veux dire capable de tuer le patient. Une approche pour acquitter ce problème serait d'utiliser différents ceps de virus dans chaque administration qui requiert le traitement, ou de "camoufler" le virus recubiréndolo des certaines molécules qui agissent comme écu (PEG) en face du système exempt. Nouvellement, c'est une voie d'investigation ouverte et active.

Comme vous pouvez voir, assez reste encore à faire, bien que le champ promette beaucoup. Pour que vous vous fassiez une idée, dans des souris, en utilisant ce système une survie totale a été obtenue en face des tumeurs metastatizados d'un pancréas (l'un des tumeurs les plus agressifs) à 30 % des cas. Beaucoup comparé aux actuelles expectatives des patients.

Des fontaines :

Martinez-Quintanilla et à. Positive selection of un gène - modified cells tu uncréais the efficacy of pancreatic un cancer suicidez-lui un gène therapy. Mol Cancer Ther (2009) vol. 8 (11) pp. 3098-107 http://mct.aacrjournals.org/content/8/11/3098.long

Fillat et à. Suicidez-lui un gène therapy mediated by the l'Herpès Simplex un virus thymidine kinase gene/Ganciclovir system : fifteen years of application. Current un gène therapy (2003) vol. 3 (1) pp. 13-26
http://www.bentham-direct.org/pages/content.php?CGT/2003/00000003/00000001/0003Q.SGM

Cascante et à. GCV modulates the antitumoural efficacy of à replicative adenovirus expressing the Tat8-TK saisis à late un gène in à pancreatic tumour model. Gene Ther (2007) vol. 14 (20) pp. 1471-80
http://www.nature.com/gt/journal/v14/n20/abs/3303008a.html

Cascante et à. Tat8-TK/GCV se suicide un gène therapy tu induis pancreatic un tumeur regression in vif. Hum Gene Ther (2005) vol. 16 (12) pp. 1377-88
http://www.liebertonline.com/doi/abs/10.1089/hum.2005.16.1377